In Vivo Electroporation: A Convenient Method for Gene Transfer to Testicular Cells in Mice

Abstract

本研究においては,マウス精巣細胞へのクロラムフェニコールアセチルトランスフェラーゼ遺伝子のトランスフェクション効率をin vivoおよびin vitroで行ったリポフェクション法,エクレクトロポーレーション法ならびにパーティクルガン法にっいて比較した.併せて,in vivoエレクトロポーレーションによってマウスの生体精巣における大腸菌βガラクトシダーゼ遺伝子の三次元空間的な発現の獲得を試みた.4週齢のICR系統雄マウスを用いて全部で3回実験を行った.その結果,用いた3種類のトランスフェクション法のうちではin vivoエレクトロポーレーション法とin vivoパーティクルガン法が最も効率が良いことが判明した.in vivoエレクトロポーレーションを用いて大腸菌βガラクトシダーゼ遺伝子を導入したところ,マウス精巣において三次元空間的な明白な遺伝子発現がX-gal染色によって確認され,X-gal染色された細胞の中には精母細胞もしくは精子細胞に類似したものも含まれていた.最大導入可能DNA量,組織の損傷およびトランスフェクション効率を考慮に入れると, in vivoエレクトトポーレーションはマウスの生体精巣細胞への外来遺伝子導入に対して優れている方法であると結論された.