A SIMPLE ELISA FOR THE DETECTION OF HAPTOGLOBIN DEFICIENCY

Abstract

背景: ハプトグロビン (Hp) 欠損は, 国内における輸血アナフィラキシー発生の一因と考えられている.目的: サンドイッチELISAを用いた簡便なHp欠損の検出法を検討する.方法: 被検患者血清コントロール血清, スタンダードHpを, ウサギ抗ヒトHpポリクローナル抗体を固相化したマイクロプレートに添加して, 10分間反応させ, プレートを洗浄後, 結合したHpをHRP標識抗ヒトHpヤギ血清およびTMB基質で検出した. 被検血清とスタンダードHpの示す吸光度を比較して患者がHp欠損か否かを判定した.結果: 上記の方法で, 血清中に存在する3μg/dL以上の濃度のHpを検出できた. また, ピークレートネフェロメトリー法で血清Hp含量が5mg/dL以下と測定された患者の中から, 先天性のHp欠損者を検出することができた. 判定は肉眼でも可能であった.結論: 本法は, 操作が簡便で, 検出感度が高い. 本法を用いれば先天性Hp欠損者と二次的に血中Hp含量が減少した患者の鑑別が可能である. 頻回輸血を必要とする患者の輸血時のアナフィラキシー発生の予防や, 将来のHp欠損者のためのドナープールの作製に有用な方法と思われる.