Cryopreservation of fish spermatozoa : Effect of cooling methods on the reproducibility of cooling rates and viability

Abstract

On examine les pratiques actuelles dans le domaine du stockage commercial de grands volumes de laitances de fletan et de saumon de l'Atlantique congeles a des temperatures negatives (-4°C), en vue de la gestion des gametes et de la production optimale des semences. L'optimisation des variables interliees, comme les techniques de collecte, la configuration des recipients, la composition etendue, la temperature et la methodologie de conservation, ainsi que le rapport sperme/oeufs, peut permettre a la duree de conservation des laitances du fletan et du saumon de l'Atlantique de depasser les 50 jours. Pour une conservation a plus long terme, la cryoconservation des gametes est necessaire. Les banques de sperme congele pourraient jouer un role decisif dans la gestion des ressources genetiques. Divers taux de reussite ont ete signale pour des spermatozoides de plus de 200 especes. Malgre le grand nombre de protocoles de cryoconservation existants, les composants de la cryoconservation restent les memes : la laitance est etendue avec, comme base physiologique, une solution saline contenant 7-10 % de sulfoxyde dimethylique, methanol ou glycerol, refroidis en paillettes ou sous formes de pastilles sur de la glace seche, ou, plus couramment, dans de la vapeur d'azote liquide ; une fois sortis de l'azote liquide, ils sont rapidement rechauffes dans un bain d'eau a 20-40°C. Les taux de reussite et l'efficacite des protocoles de cryoconservation varient en fonction de facteurs interlies, comme la qualite de la laitance avant congelation, les conditions de conservation, celles de l'emballage, les methodes et les vitesses de refroidissement, les vitesses de rechauffement et la gestion des laitances decongelees. Ces facteurs interlies sont examines analytiquement, en insistant sur l'influence des methodes de refroidissement sur la reproductibilite des protocoles et les progres recents en matiere des techniques de cryoconservation. L'optimisation de ces facteurs et la maitrise des vitesses de refroidissement ont permis des taux de fecondite proches de ceux des temoins ; au cours des essais de cryoconservation de saumon a grande echelle avec des paillettes de 5 ml, on peut produire pres de 3500 oeufs oeilles/paillette.