BHK 21 Cell Cultures for the Large‐Scale Production of Foot‐and‐Mouth Disease Virus*

Abstract

Summary 1. BHK 21 cells stored in liquid nitrogen remained alive for 2 years. 2. BHK 21 cell suspension cultures were carried out in a 150 l. vessel. A viable cell density of 2.2–2.5 times 10 6 /ml. was observed. 3. Cells propagated in deep suspension cultures were used to prepare monolayers in rolling bottles. 4. Foot‐and‐mouth disease virus was produced in BHK monolayers or deep suspension. Both antigens compared favourably with Frenkel and calf kidney type antigens. 5. In hamsters the carcinogenic capacity of BHK cells was shown by intact viable cells; no carcinogenic reactions were observed with BHK cell‐free extracts, formol‐treated cells, chloroform‐treated cells, or foot‐and‐mouth disease inactivated virus produced from BHK cells. Zusammenfassung BHK 21‐Zellkulturen zur Maul‐ und Klauenseuche‐Virus‐Produktion im Großmaßstab 1. BHK 21‐Zellen hielten sich in flüssigem Stickstoff zwei Jahre vermehrungsfähig. 2. In einem 150 l‐Gefäß wurden BHK 21‐Zellsuspensionskulturen angesetzt. Hierbei wurde eine Dichte von 2,2–2,5 times 10 6 /ml lebensfähiger Zellen festgestellt. 3. Zellen aus diesen Tiefenkulturen wurden zur Herstellung von Monolayern in Rollflaschen verwendet. 4. MKS‐Virus wurde in BHK‐Monolayer‐ und auch Tiefenkulturen produziert. Beide Antigene ließen sich durchaus mit denen des Frenkel‐bzw. Kalbsnierentyps vergleichen. 5. Bei Hamstern entfalteten nur die unbeschädigten, lebenden BHK‐Zellen eine carcinogene Wirkung. BHK‐zellfreie Extrakte, formol‐ oder chloroformbehandelte Zellen sowie MKS‐Virus aus BHK‐Zellen ließen keine carcinogenen Wirkungen erkennen. Résumé Cultures des cellules BHK 21 pour la production sur une grande échelle du virus de la fièvre aphteuse 1. Les cellules BHK 21 restent viables après 2 ans de conservation dans l'azote liquide. 2. Des cultures de cellules BHK 21 en suspension sont préparées dans des récipients de 150 l. On observe une densité de cellules viables de 2,2 à 2,5 times 10 6 /ml. 3. Les cellules de ces cultures profondes sont utilisées pour préparer des “monolayers” en bouteilles rotatives. 4. Le virus de la fièvre aphteuse est produit en BHK‐monolayers ou en culture profonde. Les deux antigènes sont sans autre comparables avec ceux du type Frenkel, resp. rein de veau. 5. Seules les cellules BHK intactes et viables développent leur propriété carcinogène chez le hamster. On n'observe aucun effet carcinogène avec des extraits exempts de cellules BHK, avec des cellules traitées au formol ou au chloroforme et avec le virus de la fièvre aphteuse issu de cellules BHK. Resumen Cultivos celulares BHK‐21 para la producción de virus aftoso en escala industrial 1. Las células BHK‐21, conservadas durante 2 años en nitrógeno líquido, mantenían su facultad reproductora. 2. En un recipiente de 150 l de cabida se alojó una suspensión de cultivo de células BHK‐21. Se contrastó una densidad celular viable de 2,2–2,5 times 10 6 /ml. 3. Las células propagadas en estos cultivos de suspensión profunda se emplearon para elaborar capas monoestratificadas en frascos rodantes. 4. El virus aftoso se produjo en capas BHK monoestratificadas y en cultivos de suspensión profunda. Ambos antígenos se pudieron comparar favorablemente con los del tipo Frenkel o del de los riñones de ternera. 5. Solo las células BHK viables intactas desarrollaban una actividad carcinógena en hamsters. Los extractos BHK libres de células, células tratadas con formol o cloroformo y el virus aftoso inactivado procedente de células BHK no permitieron reconocer reacciones carcinógenas.